Nature深度综述:RAS靶向疗法,真的不可成药吗?

文章来源: 药研网 于2020-07-02 15:56:50发布 新闻转自各大新闻媒体,新闻内容并不代表本网立场!如有侵权请联系管理员删除!

RAS(KRAS,NRAS和HRAS)是癌症中最常见的突变基因家族,因此,研究者们苦苦寻觅有效的RAS抑制剂超过30年,甚至在10年前,RAS抑制剂仍然难以捉摸,以至于RAS被认为是“ 不可成药靶点 ”。
 
但是最近,随着针对非小细胞肺癌(NSCLC)中最常见突变型RAS的等位基因特异性共价抑制剂的成功应用,开始撼动RAS不可成药的观点。
 
近日,基因泰克(Genetech)首席科学家Shiva Malek在  Nature Reviews Drug Discovery 杂志发表了题为:RAS-targeted therapies: is the undruggable drugged?的长篇综述文章。
 
这篇综述论文回顾了靶向突变RAS蛋白的疗法的最新进展,并讨论了这些疗法的未来挑战,以及组合疗法策略等

 

论文通讯作者、Genetech首席科学家—— Shiva Malek
为方便读者阅读,药研网编辑部第一时间翻译整理了这篇论文,希望对大家有所帮助。
 
RAS(KRAS,NRAS和HRAS)是癌症中最常见的突变基因家族。KRAS突变是已知的三种最致命的癌症—— 肺癌结肠直肠癌胰腺癌的驱动因素。
 
三十多年来,抑制RAS驱动的肿瘤发生的有效疗法的发展一直停滞不前,因此RAS一度被认为是“ 不可成药靶点 ”。
 
但是最近FDA授予了安进公司的靶向KRAS- G12C 突变非小细胞肺癌患者的抑制剂AMG510快速通道,临床试验已在眼前。这给RAS靶向疗法带来了巨大希望。

RAS突变肿瘤抑制剂的临床开发
 
RAS突变和剪接变体
 
RAS突变是许多癌症类型的遗传驱动因素,包括直肠癌(CRC)、胰腺导管腺癌(PDAC)、肺腺癌(LUAD,非小细胞肺癌的亚型),以及黑色素瘤和某些血液系统癌症
尽管这些肿瘤类型是由RAS突变驱动的,但是RAS突变的同工型(KRAS、NRAS、HRAS)、密码子和频率因组织类型而异。
 
具体说来,32%的肺腺癌(LUAD),86%的胰腺导管腺癌(PDAC)和41%的直肠癌(CRC)是由KRAS突变驱动的,这些突变主要发生在第12位密码子处。
29%的黑色素瘤是由NRAS突变驱动的,与KRAS不同,这些突变发生在第61位密码子上处。
 
相比之下,HRAS突变的发生频率比KRASNRAS中的突变少,5%的头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)和6%的膀胱癌是由HRAS突变驱动的,这些突变发生在第12或61位密码子处。
 


KRAS基因编码时使用不同4号外显子,从而产生两种剪接变体—— KRAS4AKRAS4B长期以来,KRAS4B被认为是主要的剪接变体,因为它在人类癌症中普遍存在并且高度表达。
 
然而,近来的研究显示KRAS4A在癌细胞系中也广泛表达,并且在直肠癌中以与KRAS4B表达水平相当。越来越多的研究重新关注了KRAS4A在肿瘤发生中的作用,这促使我们改变对抑制KRAS的观点,需要考虑到KRAS4A
 
直接靶向RAS
直接靶向抑制RAS是治疗RAS突变肿瘤的理想方法,直接靶向RAS包括switch-II突变体选择性共价抑制剂和pan-RAS抑制剂。
 
靶向KRAS-G12C的共价抑制剂
KRAS中G12是突变热点,而G12C是该位置的第三大最常见突变,共价靶向活性位点半胱氨酸是药物发现中广泛使用的策略,KRAS-G12C的半胱氨酸可以被用来开发共价小分子抑制剂,重要的是,野生型KRAS在活性位点缺乏半胱氨酸,因此可以通过这种方法特异性抑制KRAS-G12C。

靶向KRAS-G12C的小分子抑制剂

间接靶向RAS的方法

正常的RAS激活需要核苷酸交换,加工,膜定位和效应子结合。改变这些基本步骤中的一个,可用于间接抑制RAS激活。
 
核苷酸交换循环抑制剂
 
1、SOS抑制剂
 
SOS1抑制剂可与结合GDP状态的KRAS-G12C抑制剂结合使用,因为SOS1抑制会增加GDP结合的KRAS-G12C的总量。目前,SOS1抑制剂BI-1701963作为一种单一药物,以及与MEK抑制剂曲美替尼的组合疗法正处于I期临床试验中。
 
2、SHP2抑制剂
 
源自临床候选药物的RMC-4550,RMC-4630正在进行单药I期临床试验,以及和与MEK抑制剂考比替尼组合的Ib/II期临床试验。
 
第二种SHP2变构抑制剂JAB-3068目前正在进行I/II期临床试验,第三种SHP2抑制剂TNO155正在进行I期单药临床试验,以及与MRTX849组合的I/II期与临床试验。目前这些临床试验结果都还未公布。
 
RAS加工的抑制剂
 
RAS蛋白仅在定位于细胞膜时才有活性。为了与细胞膜膜结合,RAS需要进行三个酶促反应,因此抑制RAS的加工可以防止其与细胞膜结合及下游RAS信号传转导。
 
但值得注意的是,抑制这些与RAS加工有关的酶,可能导致脱靶效应。因此,直接抑制RAS最有可能成为主要的治疗选择。
 
RAS寡聚和效应子结合
 
最近发现的RAS自动抑制新机制——膜闭塞,为靶向RAS蛋白-蛋白相互作用提供了另一种潜在途径。在膜闭塞中,RAS与脂质膜之间的直接相互作用将RAS的效应子结合界面从细胞质中分离出来。
 
一个小分子Cmpd2可以结合到RAS和脂质膜之间的界面(Kd=1μM),促进膜阻塞并减少与RAF的RBD结构域的结合。
 
由于RAS-效应子接口的高度保守性,这种类型的策略为有效抑制RAS驱动的所有下游信号通路提供了机会。
 
靶向RAS通路
 
有两种靶向RAS通路的不同方法:鉴定具有RAS突变致死性的基因,靶向酪氨酸激酶受体(EGFR家族)或RAS效应子通路,即MAPKPI3K
 
1、合成致死筛选
 
在KRAS突变和NRAS突变细胞系中,除了RAS本身外,最重要的必需基因是RAF1(编码CRAF)和SHOC2。RAS突变的人类急性髓细胞白血病细胞株需要RAF1和SHOC2。

CRISPR-Cas9筛选确定曲美替尼治疗会导致SHOC2丧失合成致死。这些发现表明,SHOC2抑制剂不仅可以作为单一药物提供治疗益处,而且还可以与MEK抑制剂联用。
 
2、EGFR家族疗法
 
有证据表明RAS与受体酪氨酸激酶的EGFR家族之间存在相互作用。由于EGFR家族位于RAS的上游,因此这些受体酪氨酸激酶的失活可以减少RAS的激活。

3、MAPK途径:RAF抑制剂

活性GTP结合的RAS促进RAF二聚化和磷酸化,从而诱导RAF激酶活性并导致RAF底物MEK1和MEK2磷酸化。磷酸化级联继续与末端激酶ERK1和ERK2的MEK磷酸化。
 
ERK激酶活性既激活包括ETS家族成员在内的促进生长的转录因子,又参与负反馈回路,此动态过程控制MAPK信号级联的持续时间和幅度。
 
ERK可以通过磷酸化上游成分SOS或CRAF或改变双特异性磷酸酶(DUSP)家族和Sprouty(SPRY)家族的转录来负面抑制MAPK信号传导。DUSPs通过隔离SOS-GRB2来使ERK和SPRYs磷酸化,从而抑制受体酪氨酸激酶信号传导。
 
为了有效治疗RAS突变肿瘤,必须几乎完全抑制MAPK途径。实现这一目标的一种策略是使用针对MAPK途径成分的激酶抑制剂,结合针对本综述中讨论的其他机制的疗法。
 
4、MAPK通路:MEK抑制剂
 
目前,有三种靶向MEK的变构激酶抑制剂——Cobimetinib、Trametinib和Binimetinib,临床批准用于治疗  BRAF  V600 突变型黑色素瘤但MEK抑制剂作为RAS突变肿瘤的单一疗法的临床试验没有发现任何改善,目前没有一种MEK抑制剂被临床批准用于治疗RAS突变肿瘤。
 
但是,在具有高水平内在核苷酸交换水平的突变KRAS细胞(例如KRAS-G13D)中观察到了MEK和RAF的最强协同作用,该突变KRAS增强了GTP结合的RAS水平:该观察结果表明, MEK抑制可导致RAF二聚化,可能有助于这种协同作用。
 
目前,有两项RAF抑制剂和MEK抑制剂联用的I期临床试验正在进行。一个Belvarafenib和Cobimetinib的联用,另一个是曲美替尼和LXH-254的联用。
 
5、MAPK通路:ERK抑制剂
 
抑制级联反应中的最终激酶ERK可以直接降低致癌转录产物,并为抗MEK或RAF抑制作用的肿瘤提供有价值的治疗选择。ERK抑制剂的临床开发落后于MEK,BRAF单体和pan-RAF抑制剂的开发。
 
此外,ERK抑制剂用于治疗RAS突变肿瘤的早期临床试验在很大程度上还没有成功。
 
总体而言,单药MEKRAFERK抑制剂在治疗RAS突变型肿瘤方面几乎没有疗效因此,这些抑制剂将必须与MAPK通路的其他抑制剂或本综述中讨论的其他方法结合使用。寻找每种抑制剂的最佳组合将是一个挑战,但是,等位基因特异性RAS抑制剂的出现增加了可用于实现最大途径抑制的潜在组合的数量。
 
6、PI3K通路抑制剂
 
在所有RAS效应子中,MAPK通路一直是抑制RAS突变型肿瘤的主要焦点。但是,RAS也激活了第二个效应子通路PI3K
 
目前有四种I类PI3K抑制剂获得FDA批准,但这些抑制剂都未被批准用于治疗RAS突变肿瘤。RAS激活PI3K和MAPK通路,并且存在重叠的反馈机制。抑制一个通路可导致另一种通路的代偿性激活。因此,同时抑制MAPK和PI3K是一种值得注意的策略
 
临床前研究表明,PI3K和MEK的联合抑制对于RAS突变肿瘤的治疗是有效的,在临床上是可以实现的。
 
然而,在临床试验中,这些抑制剂的组合是不耐受的,因此几乎没有实际疗效,大概是由于毒性导致剂量减少的结果。
 
临床中的单药治疗

临床中的组合疗法

新兴疗法
小干扰RNA(siRNA)疗法
 
阿斯利康开发的一款名为AZD4785的siRNA疗法,在小鼠模型中能够有效特异性靶向KRAS突变,但临床试验结果并不显着。
 
Silenseed公司进行的名为siG12D- LODER的siRNA疗法,在1期临床试验中显示出对胰腺导管腺癌(PDAC)的希望,而与标准化学疗法联用的2期临床试验正在进行中。

自噬
 
胰腺导管腺癌(PDAC)癌细胞的细胞自噬水平升高,这些细胞需要自噬才能生长,羟氯喹能够有效抑制自噬水平,尽管用羟氯喹治疗PDAC的疗效有限,但是在NRAS突变型黑色素瘤和PDAC的临床前模型中,羟氯喹和MAPK抑制剂的组合显示出令人鼓舞的结果。
 
有了这个令人鼓舞的结果,目前正在评估一项1期临床试验,以研究曲美替尼联合羟氯喹治疗胰腺导管腺癌(PDAC)患者的疗效。
 
免疫疗法
 
1、免疫检查点抑制剂
 
有研究表明,KRAS突变的肿瘤中PD-L1水平升高,以提高免疫逃逸。目前已有多项RAS抑制剂、MEK抑制剂、SHP2抑制剂与PD-1/PD-L1抑制剂联用治疗非小细胞肺癌的临床试验。
 
2、过继细胞疗法
 
治疗RAS驱动癌症的第二种免疫治疗方法涉及改造免疫系统,以特异性识别突变RAS蛋白。这种方法通过改造T细胞,离体扩增后再回输到患者体内。目前有两项分别靶向RAS-G12D和RAS-G12V的过继细胞疗法临床试验正在进行中。
 
3、癌症疫苗
 
治疗RAS突变肿瘤的第三种免疫疗法方法是使用已知的RAS突变肿瘤抗原通过疫苗接种引起T细胞应答。
 
Targovax公司开发的名为TG-01的针对RAS突变的PDAC患者的I/II期临床试验显示出患者免疫反应增强,总生存期延长。其第二代疫苗TG-02已用于治疗直肠癌患者,但尚未公布结果。默沙东针对KRAS突变的mRNA疫苗也已开始临床试验,且该疫苗可与派姆单抗联用。
 
未来发展方向
 
KRAS-G12C等位基因特异性抑制剂将改变RAS驱动肿瘤的治疗前景。这些抑制剂有望成为FDA批准的RAS突变型肿瘤的首批治疗剂,并将用于治疗由RAS突变驱动的难治性癌症,例如PDAC,CRC和LUAD。尽管这些抑制剂的开发振奋人心,但新的挑战和问题也将出现。
 
首先,RAS中的每个变异都有独特的生化特性,这些特性将决定对治疗方法的不同反应。例如,使用RMC-4550抑制SHP2可以有效治疗具有KRAS G12突变的细胞,并且对KRAS G12C比对KRAS G12D或KRAS G12V更有效。该观察结果表明,SHP2和KRAS-G12C抑制剂的组合将是一种有效的治疗策略。在开发联合疗法时,有必要了解特定突变体RAS密码子的要求和抑制剂对这些等位基因的反应。
 
其次,肿瘤类型会极大地影响缓解率,RAS突变的CRC和PDAC对MAPK抑制剂或免疫检查点封锁的反应很小。AMG 510试验的早期数据表明,CRC比LUAD更难治疗,表明CRC需要使用联合疗法。
 
第三,第三,从经验来看,联合疗法容易有毒副作用,且安全性较差。然而,AMG 510并未观察到剂量限制性毒性,并且突变体特异性疗法应具有有限的脱靶作用。等位基因特异性抑制剂(毒性低)可以与毒性更大的其他抑制剂组合使用,而不会遇到像PI3K和MEK抑制剂组合那样将两种有毒化合物组合在一起所观察到的问题。
 
总的来说,FDA对RAS靶向疗法AMG510开放快速通道,这是一个激动人心的时刻,让我们对成功治疗RAS突变癌症重新燃起了希望


 
参考链接:
https://www.nature.com/articles/s41573-020-0068-6


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