CAR 免疫疗法的成功激发了研究者们利用其他免疫细胞进行癌症治疗的兴趣。简而言之,细胞免疫疗法就是采集人体自身免疫细胞,经过体外培养使其数量倍增,然后再回输到人体。一方面,用于消除癌细胞、突变细胞;另一方面,激活并增强机体免疫力,控制癌细胞的转移和复发。与 CAR - T 疗法相比,NK 疗法能够靶向多种致病性抗原,具有更强的细胞毒性,且不分泌引发细胞因子释放综合征(CRS)的主要细胞因子,能够极大地减轻不良反应的风险,因而被寄予厚望。
NK 细胞治疗的主要策略
包括体外活化的自体或异体 NK 细胞、NK 细胞与单抗药(如免疫检查点抑制剂)联合以诱导抗体特异的细胞毒性(例如抗 EGFR 的西妥昔单抗)、CAR - NK 细胞免疫疗法等等。
NK 细胞纯化最常用的方式是磁珠分选,包括阳性分选和阴性分选两种。人 NK 细胞发育阶段主要基于 CD34、CD117、CD56 和 CD94 的表达水平。CD56 表达增加是 NK 成熟的关键,CD56 + 和 CD16 + 可以鉴别和分离不受其他淋巴细胞污染的 NK 细胞。此外,白细胞介素 2/15 受体 β(CD122)也是 NK 细胞发育后期的重要标志。
NK 细胞培养
将纯化后的 NK 细胞用免疫细胞无血清培养基(abs9772)重悬,按照一定密度接种于培养皿或培养瓶中。
在免疫细胞无血清培养基中添加 100 - 200IU/mL 的 IL - 2,确保 NK 细胞的增殖和活化并有助于提高细胞毒性。与 IL - 15 联合应用可促进 NK 细胞的增殖,有利于 NK 细胞的激活。